Маҷмӯаи антителоҳои зидди тухмдон (AO) ELISA

Ин маҷмӯа антителоҳои зидди тухмдонҳоро (IgG) дар намунаҳои хунобаи инсон дар асоси усули ғайримустақим бо антигенҳои тозашудаи мембранаи тухмдонҳо, ки барои пеш аз пӯшонидани микроэлементҳо истифода мешаванд, муайян мекунад.

Раванди озмоиш бо илова кардани намунаи хуноба ба чоҳҳои реаксияи антиген барои инкубатсия оғоз меёбад. Агар дар намуна антителоҳои зидди тухмдон мавҷуд бошанд, онҳо ба таври махсус ба антигенҳои мембранаи тухмдонҳои қаблан пӯшидашуда дар микроэлементҳо пайваст шуда, комплексҳои устувори антиген-антитело ташкил медиҳанд. Пас аз он ҷузъҳои ҷудошуда хориҷ карда мешаванд, то дақиқии ошкорро таъмин кунанд.

Баъдан, ба чоҳҳо антителоҳои зидди инсонии IgG-и муш бо аломати пероксидаза (HRP) ҳамроҳ карда мешаванд. Пас аз инкубатсияи дуюм, ин антителоҳои бо фермент ишорашуда ба таври махсус ба антителоҳои зидди тухмдон дар комплексҳои мавҷудаи антиген-антитело пайваст шуда, комплекси иммунии пурраи "тамғаи антиген-антитело-фермент" -ро ташкил медиҳанд.

Дар ниҳоят, маҳлули субстрати TMB илова карда мешавад. HRP дар маҷмаа реаксияи химиявиро бо TMB катализ мекунад ва тағироти намоёни рангро ба вуҷуд меорад. Қабули маҳлули реаксия (А арзиши) бо истифода аз микроплата хонанда чен карда мешавад ва мавҷудият ё набудани антителоҳои зидди тухмдон дар намуна дар асоси натиҷаи абсорбент муайян карда мешавад.